通过多路复用Pyroptosis检测细胞死亡和生物荧光Caspase-1活动评估

Pyroptosis是一个独特的免疫原性的细胞死亡形式依赖inflammasome激活,引起了在模式识别受体(PRRs)微生物感染或细胞感觉压力。Caspase-1 inflammasomes的一个重要组成部分,调和这先天免疫反应处理细胞因子和引起细胞死亡。除了caspase-1之外,还存在其他炎症(caspase-11在老鼠和caspases-4, 5人)可以打通gasdermin D和引出pyroptosis回应一些细胞内微生物感染。然而,caspase-1也是激活在这种情况下,因此caspase-1激活重合与pyroptosis的细胞死亡是一个可靠的指标。理解当PRR传感导致细胞死亡和不理解的复杂性是必要的先天免疫反应。我们已经开发出一种方便的方法来监控pyroptosis通过多路复用在同一试验我们的均匀,发光caspase-1 membrane-impermeant活动分析,稳定DNA染色检测细胞死亡。与端点检测对细胞死亡如乳酸脱氢酶(LDH)测定、DNA染料可用于实时。细胞死亡可以随着时间的推移,当首次检测到,监控caspase-1试验可以证实pyroptosis执行。另外,培养基可以删除测试caspase-1释放,使得细胞可以通过各种各样的方式测量细胞死亡。我们展示的例子在人类THP-1 pyroptosis J774A单核细胞和老鼠。1巨噬细胞。